技术简介:本发明涉及的是用蛇毒制备神经生长因子的工艺方法,在大量实验基础上,优选眼镜蛇毒,在10℃以下条件下操作,经CM-SepnadexC50、CM-SphatoseFF、SepndexG75三步层析,制成半成品,加入稳定剂白蛋白和冻干制品的赋形剂右旋糖苷,过滤分装,冻干制得。1、蛇毒酶神经生长因子,其特征在于:他有一个科学的制备工艺:所有操作均在10℃以下完成。①CM-Sephadex C50层析取眼镜蛇毒10g,溶于0.01M乙酸钠缓冲液、(FH5.8)100ml中,溶解后,离心10000转,10分钟,取上清,对上述缓冲液5000ml透析,换3次缓冲液,然后样品上样于用0.01M乙酸盐缓冲液平衡好的层析柱(5.5×100cm)中,用0-0.7MNaCL线性梯度洗脱,收集具有神经生长因子活性的蛋白峰,浓缩冻干。②CM-SpharoseFF层析将上述浓缩的样品;溶于20ml0.01M乙酸钠缓冲液(FH5.8)中,上样于用0.01M乙酸钠缓冲液(PH5.8)平衡好的层析柱(2.6×50cm)中,用0-1MNaCL线性梯度洗脱,收集具有神经生长因子活性的蛋白峰,浓缩冻干。③SephdexG75层析将上述CM-SpharoseFF层析下的样品,溶解在10ml0.01M乙酸钠缓冲液,PH5.8内含0.15MNaCL中,离心10000转,取上清,上sephdexG75(2.6×100cm)柱(已用0.01M乙酸钠缓冲液,PH5.8,内含0.15M/L平衡好),收集含有