一种蚓激酶制备工艺

技术简介:本发明公开了一种蚓激酶制备工艺,将蚯蚓经生理盐水处理,采用匀浆、冻融法制备蚯蚓粗提物,然后通过超滤、亲和层析、离子交换及分子筛等技术组合,从蚯蚓中提取纯化三种有纤溶活性的蚓激酶,其分子量分别为3.0±0.2万、2.5±0.2万及2.2±0.2万的三种蛋白质,其纯度分别达到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示一条带,高效液相色谱(HPLC)呈现一个峰的水平,其纤溶活性均为每mg含相当于尿激酶活性1000单位以上。体外溶血栓试验证明有良好的直接溶栓作用;动物体内试验证明,其体内溶血栓活性优于尿激酶。1、一种蚓激酶制备工艺,包括以下工艺制备:将蚯蚓用清水洗净泥土,加入生理盐水冲洗处理,按(V/V) 1:3~5的比例加入0.2MpH4.6 ~ 4.8的柠檬酸钠制成匀浆,经1000~4000rpm离心20~40分钟,取上清液,通过超滤法去除大分子蛋白,滤液用亲和层析法初步纯化,,收集活性组分,再通过离子交换柱进一步纯化,取其活性组分,再经分子筛层析,分段收集各个活性组分,取分子量为3.0 ±0.2万、2.5±0.2万及2.2+0.2万的三种活性蛋白质。

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