技术简介:一种重组超氧化物歧化酶基因序列及其工程菌产物制备方法。其基因自丝状兰藻-鱼腥藻的总DNA中获得,克隆到pET3d载体上,转化到大肠杆菌BL21(DE3)上,得工程菌。将工程菌高密度培养,用IPTG诱导后,基因大量表面。产物经DEAE-SephadexA-50柱层析,产物一种重组超氧化物歧化酶被纯化。采用本发明的方法,准确获得含有199个氨基酸残基的成熟蛋白序列,该酶具有抗氧化、抗衰老作用,在医药和农业上有潜在的应用前景。本方法菌体产量高,表达量高,产物表达量占菌体可溶蛋白的40%,占包含体约为60%,纯化容易,酶活性高。一种重组超氧化物歧化酶基因序列,其特征在于其核苷酸序列和相应的氨基酸序列为: 5′ ATG GCA TTT GTA CAG GAA CCA CTA CCC TAC GAC TTT AAT GCT TTA GAG CAG TAT ------ --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- Met Ala Phe Val Gln Glu Pro Leu Pro Tyr Asp Phe Asn Ala Leu Glu Gln Tyr GGC ATG AAA GGT GAA ACC TTC GAG TAT CAC TAC GGC AAA CAT CAC AAA GCT TAT --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- --- ---