从鸡血中提取鸡核酸及核蛋白的方法

技术简介:一种以鸡血中提取鸡核酸及核蛋白的方法,它主要是以加有抗凝剂的新鲜鸡血为原料进行直接匀浆破碎处理或沉降后的匀浆破碎处理以及低渗盐溶血处理提取细胞核,再用浓盐法、去垢剂法及稀碱法从细胞核中提取核酸。从鸡血中提取核蛋白可取由上述方法得到的细胞核用氯化钠处理,再向得到的核蛋白溶液中加无水乙醇或冷水。本发明原料充足、成本低、还解决了鸡血的污染;本发明易工业化,而且还可针对不同的使用目的是采用不同的方法。一种从鸡血中提取鸡核酸的方法,其特征在于:(1)原料及处理:取新鲜鸡血并向其内加入0.5克/每100毫升鸡血的柠檬酸钠抗凝剂,(2)从抗凝鸡血中提取细胞核,①对沉降后的抗凝鸡血进行血细胞匀浆破碎处理,或②对沉降后的抗凝鸡血进行低渗盐溶血方法处理,或③对抗凝鸡血直接进行匀浆处理,(3)从细胞核中提取核酸,①浓盐法:用5~10%的氯化钠於4℃对细胞核处理20小时,且两者的体积比为细胞核∶氯化钠溶液=1∶30,用蛋白质变性剂处理核蛋白溶液,再用无水乙醇处理核酸溶液,或②去垢剂法:用20%十二烷基磺酸钠於PH=9.0处理细胞核终浓度2%,用蛋白质变性剂处理核蛋白溶液,再用无水乙醇处理核酸溶液,或③稀碱法:用1N氢氧化钠或氢氧化钾溶液於PH=12.6对细胞核处理30分钟,用蛋白质变性剂处理核蛋白溶液,再用无水乙醇处理核酸溶液。

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