技术简介：从尖吻蝮蛇中分离纯化得到类凝血酶，测定该酶Ｎ端１５个氨基酸的序列，据此设计简并的上游引物，其中含有翻译起始密码子ＡＴＧ，以利于该基因的表达。然后根据与其它蝮属蛇毒类凝血酶３’非编码区同源性较高区域设计简并的下游引物。从毒腺中抽提总ＲＮＡ，用ＰＣＲ扩增出该基因，克隆后经全序列测定表明该成熟蛋白的ｃＤＮＡ编码６９９个核苷酸，即２３３个氨基酸。该基因的成功克隆及基因序列测定为开发基因工程产品创造良好条件。一种编码为尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶的核苷酸序列，其特征在于它具有如下的ＤＮＡ核苷酸及相应的氨基酸序列： ＡＴＧＧＴＣＡＴＴＧＧＡＧＧＴＧＡＴＧＡＧＴＧＴＧＡＣＡＴＡＡＡＴＧＡＡＣＡＴＣＧＴＴＴＣＣＴＴＧＴＡＧＣＣＴＴＣＴＴＴ ６０ Ｍ ＶＩ Ｇ Ｇ Ｄ Ｅ Ｃ Ｄ Ｉ Ｎ Ｅ Ｈ Ｒ Ｆ Ｌ Ｖ Ａ Ｆ Ｆ ＡＡＣＡＣＴＡＣＴＧＧＡＴＴＴＴＴＣＴＧＴＧＧＴＧＧＧＡＣＴＴＴＧＡＴＣＡＡＣＣＣＧＧＡＡＴＧＧＧＴＧＧＴＣＡＣＴＧＣＴ １２０ Ｎ Ｔ Ｔ Ｇ Ｆ Ｆ Ｃ Ｇ Ｇ Ｔ Ｌ Ｉ Ｎ Ｐ Ｅ Ｗ Ｖ Ｖ Ｔ Ａ ＧＣＡＣＡＣＴＧＣＧＡＣＡＧＴＡＣＡＡＡＴＴＴＣＣＡＧＡＴＧＣＡＧＣＴＴＧＧＴＧＴＧＣＡＴＡＧＣＡＡＡＡＡＧＧＴＡＣＴＡ １８０ Ａ Ｈ Ｃ Ｄ Ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｑ Ｍ Ｑ Ｌ Ｇ Ｖ Ｈ Ｓ Ｋ Ｋ Ｖ Ｌ ＡＡＴＧＡＧＧＡＴＧＡＧＣＡＧＡＣＡＡＧＡＡＡＣＣＣＡＡＡＧＧＡＧＡＡＧＴＴＣＡＴＴＴＧＴＣＣＣＡＡＴＡＡ