技术简介：本发明公开了一种从糖源以工业规模廉价生产的Ｌ－脯氨酸为原料，利用发酵法，通过直接用微生物或酶进行羟基化处理后，以工业规模生产顺式－３－羟基－Ｌ－脯氨酸的方法及用于该方法的Ｌ－脯氨酸３位羟基化酶。顺式－３－羟基－Ｌ－脯氨酸的制造方法，其特征是将可在Ｌ－脯氨酸的３位上催化羟基化反应的酶源、二价铁离子、２－酮戊二酸及Ｌ－脯氨酸存在于水溶性介质中，使得Ｌ－脯氨酸转化成顺式－３－羟基－Ｌ－脯氨酸，而后从该水溶性介质中提取顺式－３－羟基－Ｌ－脯氨酸。