微生物发酵法生产青霉素酰化酶

技术简介:一种用微生物发酵生产青霉素酰化酶的方法。以巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)为出发菌,经物理和化学因子反复诱变处理,得到产胞外青霉素酰化酶高产菌株。在适宜的发酵培养条件下,酶活达700-800单位/100ml,最高达820单位/100ml(NIPAB法)。发酵液经分离提纯,酶比活20单位/mg蛋白以上,可直接用于固定化酶的制备。一种利用微生物发酵生产青霉素酰化酶的方法,该方法包括菌种的筛选和诱变,发酵,酶的分离提纯步骤,其特征在于:(1)、以筛选的巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)为出发菌进行反复诱变处理,得到产胞外青霉素酰化酶的高产菌株巨大芽胞杆菌81号(CGMCCNO.0145),  (2)、将种子培养液接入含1.0%葡萄糖,1.5%蛋白胨,0.3-0.9%酵母膏,0.1-1.1%苯乙酸的发酵培养基中,发酵起始培养PH为6.5-8.5,在28℃±1℃摇床培养30-72小时,摇床速度为180-200rpm,  (3)、用吸附,洗脱,超过滤步骤提纯青霉素酰化酶。

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