技术简介:一种提纯超氧化物歧化酶的方法,该方法中采用冻融技术使红血球膜破裂,提高超氧化物歧化酶的产量。用超滤技术平衡和浓缩含超氧化物歧化酶的溶液可缩短流程周期和节约大量磷酸钾缓冲液。该方法中省去了常用的洗涤猪血步骤,大大缩短了流程周期,采用即时浓度洗脱方法,保证超氧化物歧化酶的纯度。所以该方法周期短、产量高、成本低、方法简单,适宜于批量生产超氧化物歧化酶。一种超氧化物歧化酶的提纯方法,工艺流程有如下步骤:(1)新鲜猪血经抗凝、防腐后,静置、离心, (2)将红血球在低温下冷冻,然后用蒸馏水融化, (3)溶化液用酒精和丙酮抽提, (4)抽提液用磷酸钾盐析, (5)盐析后的溶液用丙酮沉淀,再用磷酸钾缓冲液溶解,(6)溶解液用超滤器平衡、浓缩, (7)浓缩液用柱层析法分离,淋洗浓度为即时洗脱浓度, (8)含盐的SOD溶液用超滤器脱盐, (9)脱盐的SOD纯品液干冻成粉。