技术简介：本发明涉及人重组组织因子的构建、表达和纯化方法及应用。从人胎盘中获取得到的TF基因片段与phoA质粒重组，构建质粒载体pTF243，转化到大肠杆菌MM294中，筛选得到工程菌株，接入培养基直接发酵表达，得到的菌液先使用Q-Sepharose Fast Flow基质离子交换层析，再通过TF单抗免疫亲和层析柱吸附洗脱，得到rhTF243蛋白。本发明中TF随培养基中磷的消耗而直接表达，不需增加诱导物和对蛋白质进行变性与复性，简化了发酵工艺，提高了表达率，采用TF单抗纯化rhTF243蛋白，不会受到不可逆损伤，获得rhTF243纯度95％以上，收率大于60％，制备的PT试剂稳定性和敏感性均得到了提高。1、一种人重组组织因子，含有天然人组织因子跨膜部分和膜外部分的243个氨基酸残基，为缺失胞内区的截断型人重组组织因子recombinanthumantissuefactor，简称rhTF243，具有天然人组织因子的全部凝血活性。