技术简介：本发明涉及一种快速扩增食线虫真菌胞外丝氨酸蛋白酶基因的方法和应用，属于分子生物学和应用微生物学领域。本发明设计了5对简并引物(共6条)用于快速扩增捕食线虫真菌的胞外丝氨酸蛋白酶基因。本发明设计的5对简并引物序列为：引物1，AARTAYATYGTCAAGYWSAAG/AYRTGDGGRSWRGCCATSGA；引物2， AARTAYATYGTCGTCYWSAAG/AYRTGDGGRSWRGCCATSGA；引物3，AARTAYATYGTCGTCYWSAAG /TTAAGYRKHKCCRTTGWAG；引物4，MAWGMTKWYGAACSKYCT/GTRTCRATGACGTAGACKG；引物5，MAWGMTKWYGAACSKYCT/TTAAGYRKHKCCRTTGWAG。本发明以捕食线虫真菌基因组DNA作为模板，通过以上引物快速扩增胞外蛋白酶的编码基因。本发明能够快速扩增捕食线虫真菌胞外丝氨酸蛋白酶基因，具有良好的应用前景。1、一种快速扩增食线虫真菌胞外丝氨酸蛋白酶基因的方法，包括真菌培养、真菌基因组DNA的提取、用引物进行PCR扩增、扩增片段测序及测序结果分析步骤，其特征在于本方法中所用引物由下列方法设计得到： (1)选择GenBank上发表的下列真菌和胞外丝氨酸蛋白酶的编码基因用于简并引物设计； 真菌名称蛋白酶性质GenBank索引 号 Arthrobotrys表皮降解丝氨酸蛋X94121 oligospora白酶(PII) Arthrobotrys中性丝氨酸蛋白酶AF516146 oligospora(Aozl) Paecilomyces丝氨酸蛋白酶(Pr)L29262 lilacinus Verticillium碱性丝氨酸蛋白酶AJ427460 chlamydosporium(VCP1) Beauveria表皮降解丝氨酸蛋AF154118 bassiana白酶(Pr) Metarhizium丝氨酸蛋白酶AJ251925 anisopliae(PrA) Cordyceps表皮降解蛋白酶AY520815 brongniartii(Pr1) Fusariumsp.碱性蛋白酶S71812 S-19-5(A