技术简介：本发明涉及一种重组人尿激酶原的纯化方法，更具体地说是用色谱技术纯化制备重组人尿激酶原的方法。为了解决动物细胞表达的尿激酶原的大规模纯化问题，本发明公开了一种用Streamline-SP扩张床色谱、Sephacryl S-200凝胶色谱、对氨基苯甲脒Sepharose Fast FlowFlow亲和色谱和DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换色谱法，从哺乳动物工程细胞培养液回收基因工程产品的方法。还可以在步骤C和D之间包括步骤E：用阳离子交换Streamline-SP固定床色谱柱浓缩尿激酶原。采用上述方法得到符合SFDA要求的重组人尿激酶原，总回收率在70％以上，纯度达到99％以上。1、一种重组人尿激酶原的纯化方法，其特征在于该方法包括如下步骤：A.用阳离子交换Streamline-SP扩张床色谱从工程细胞培养上清中回收重组人尿激酶原；B.用SephacrylS-200凝胶色谱进一步纯化上述A收集的尿激酶原粗产品；C.用对氨基苯甲脒-SepharoseFastFlow亲和色谱法除去粗产品中的尿激酶；D.用DEAE-SepharoseFastFlow阴离子交换色谱除去重组人尿激酶原中残留细胞的DNA。