技术简介：本发明公开了一种猪金属硫蛋白的检测方法，涉及动物金属硫蛋白的检测方法，具体地说，涉及一种猪金属硫蛋白定性、定量检测的方法。本发明是用达到电泳纯的小鼠抗猪金属硫蛋白IgG作一抗，用山羊抗小鼠酶标抗体作二抗，采用固相抗原间接竞争型酶联免疫吸附法，测定猪金属硫蛋白的含量；其步骤有：①包被；②封闭；③加一抗与样品；④加酶标二抗；⑤加底物；⑥加终止液；⑦在酶标仪上450nm波长读数。本发明可以定性、定量检测在正常生理状态下猪体内各组织器官的金属硫蛋白；方便、快捷，灵敏度高，稳定性和重复性好；成本较低，取材容易，实用性强。1、一种猪金属硫蛋白的检测方法，包括固相抗原间接竞争型酶联免疫吸附法；其特征在于用达到电泳纯的小鼠抗猪金属硫蛋白IgG作一抗，用山羊抗小鼠酶标抗体作二抗，采用固相抗原间接竞争型酶联免疫吸附法，测定猪金属硫蛋白的含量；其步骤如下： ①包被——加含标准品金属硫蛋白MT的包被液即碳酸钠缓冲液 90-110μl/孔，3-5℃包被过夜；取出，每孔加洗涤液即含0.050％tween-20 的磷酸缓冲液240-260μl，静置2.5-3.5min，洗涤3-5次； ②封闭——每孔加封闭液即含10.00％新生牛血清的磷酸缓冲液 180-220μl，36.9-37.5℃封闭1.5-2.5hr，以转速40-60转/分振荡，并以不振荡出孔内溶液为限，取出，每孔加洗涤液240-260μl，静置2.5-3.5min，洗涤3-5次； ③加一抗即抗猪金属硫蛋白IgG与样品——将等量的含抗体和标准品或待测品的稀释液即含0.050％tween-20和0.150％牛血清白蛋白的磷酸缓冲液混合均匀后，加混合液90-110μl/孔，同一样品重复2-3孔，36.9-37.5℃反应 2.5-3.5hr，以转速40-60转/分振荡，