技术简介:一种溶菌酶的提取方法,其步骤为:a.取蛋清、除杂质;b.用724树脂洗脱;c.加硫酸铵沉淀,d.透析;e.盐析、干燥。所需要原料为:硫酸铵、磷酸盐缓冲液、盐酸、氢氧化钠,724树脂、盐酸(36%-38%)、氢氧化钠、无水乙醇、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、硫酸铵。工艺流程是:蛋清→搅拌→与树脂混合→冲洗→加缓冲液→冲洗→硫酸氨→过滤→硫酸氨→沉淀→过滤→成品。1.一种溶菌酶的提取方法,其特征是,按如下步骤提取: a、取蛋清、除杂质; b、洗脱:在724树脂中加入等体积PH值6.5,0.15摩尔/升缓冲液,搅拌30分钟,弃去缓冲液,按同法再处理一次,最后将除去杂物的树脂加入1倍量浓度为10%的硫酸铵溶液,搅拌洗脱1.5小时,滤出并收集洗脱液,按上法再收集一次合并二次洗脱液放入沉淀缸中。 c、沉淀:在沉淀缸中按洗脱液体积分别加入40%的固体硫酸铵,充分搅拌使其完全溶解,此时,白色沉腚产生,在冷处置过夜,去上清液,收集沉淀。 d、透析:将沉淀用量蒸馏水全部溶解,然后装入透折袋中,在冷水透析过夜,收集透所液。 e、盐析、干燥:将透析过认收集在溶器中用1∶4的盐酸(即1份盐酸加4份水)调PH3.5,加入6%的氢氧化钠,搅均,冷处放置48小时,收集沉淀物干燥即得溶菌酶产品。