技术简介:一种重组人干扰素α1b的纯化工艺,用于从表达人干扰素α1b的工程菌中提取重组人干扰素α1b,包括细菌破碎、扩张床吸附、亲合层析和凝胶过滤步骤。细菌破碎是在Tris-HCl 缓冲液中进行;所述扩张床吸附步骤中,选用阴离子凝胶,缓冲体系选用pH值为7.4的 Tris-HCl,并选用0.4MNaCl pH7.4 50mM Tris-Hcl洗脱液一步洗脱。所述亲和层析步骤中,选用α1b干扰素的单克隆抗体偶联的凝胶;平衡液采用PBS,清洗液采用PBS,洗脱液采用 0.1M Gly-HCl,再生液采用0.1M Tris-HCl及0.1M NaAc-HAc缓冲液。所述凝胶过滤步骤中,选用Sephacryl凝胶,缓冲体系选用PBS。采用本重组人干扰素α1b的纯化工艺,生产效率可以大大提高,生产成本则大大降低。1.一种重组人干扰素α1b的纯化工艺,用于从表达人干扰素α1b的工程菌中提取重组人干扰素α1b,包括细菌破碎,以及目标蛋白的捕获、中间纯化和精制过程,其特征在于: 所述目标蛋白的捕获过程采用扩张床吸附,中间纯化过程采用亲合层析,精制过程采用凝胶过滤。