重组复合干扰素工程菌的构建方法

技术简介:一种重组复合干扰素工程菌的构建方法,其特征是将含重组复合干扰素DNA序列的杂交质粒,转入大肠杆菌K12,进行扩增杂交质粒,经过筛选抗四环素但对氨卞青霉素敏感的细菌克隆,采用杂交翻译法挑选含有重组复合干扰素cDNA的克隆,将重组复合干扰素 cDNA克隆转入表达载体在大肠杆菌中进行高效表达。本发明的优点是构建的基因工程菌能够在LB培养基或M9培养基中生长良好。产物以包含体形式存在于细胞内,外源基因最大表达量可占细胞总蛋白的 50%。生产中,可以用乳糖作为诱导剂,降低发酵成本。该工程菌所表达的产物,临床研究表明,对治疗病毒性肝炎疗效稳定,提高疗效,使用的剂量低,减少副反应,使用上更为广泛和方便。1、一种重组复合干扰素工程菌的构建方法,其特征是:将含重组复合干扰素DNA序列的杂交质粒,转入大肠杆菌K12,进行扩增杂交质粒,经过培养传代筛选抗四环素但对氨卞青霉素敏感的细菌克隆,采用杂交翻译法挑选含有重组复合干扰素cDNA的克隆,将重组复合干扰素cDNA克隆转入表达载体在大肠杆菌中进行高效表达。

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