技术简介:本发明涉及15N稳定性同位素标记L-谷氨酸的生产工艺,该工艺包括发酵菌株的选择、保藏斜面制备、活化斜面制备、种子培养、发酵培养基的配制、发酵工艺、分离提取等工艺步骤;本发明利用微生物直接发酵法生产,控制有机氮源添加量,直接添加生产因子,通过物理条件控制细胞膜通透性,并采用低糖流加工艺改善产酸率,这样可使15N原料得到有效利用,丰度下降不致于影响产品生产要求。1.15N稳定性同位素标记L-谷氨酸的生产工艺,其特征在于,该工艺包括以下步骤: (1)发酵菌株的选择:用于L-谷氨酸生产的谷氨酸棒杆菌 (Corynebacteriumglutamicum)、黄色短杆菌(Brevibacteriumflavum)、乳糖发酵短杆菌(Brevibacteriumlactofermentum)、北京棒杆菌(Corynebacterium pekinense)、钝齿棒杆菌(Corynebacterium)之一; (2)保藏斜面制备:将上述发酵菌株接种于斜面,29~37℃恒温培养8~ 20小时,得到保藏斜面,冷藏待用; (3)活化斜面制备:将步骤(2)得到的保藏斜面接种于活化斜面,培养方法同步骤(2); (4)种子培养:将步骤(3)得到的活化斜面菌苔接种于已灭菌的装有种子培养基的摇瓶中,在29~37℃下摇床培养8~20小时; (5)发酵培养基的配制:以全合成培养基为基本培养基,添加少量有机氮源;主要配方如下表所示:说明碳源葡萄糖6~14g/dL或蔗糖12~25g/dL 无机氮源尿素0.2~1g/dL、氨水、液氨或氯化铵、硫酸铵、硝酸铵类铵盐按碳氮比100∶15