适合于分子生物学研究的家蚕丝腺细胞分离方法

技术简介:本发明公开了一种适合于分子生物学研究的家蚕丝腺细胞分离方法。是以新鲜的或冷冻的家蚕幼虫为材料,在预冷的昆虫生理盐水中解剖幼虫,获取家蚕中部和后部丝腺,并用生理盐水充分洗净后,转入预冷的乙醇或甲醇中,浸渍一定时间后,将丝腺固定,用一把镊子一边抱握丝腺表层,一边拉动,剥取丝腺细胞。将上述丝腺细胞在真空干燥器中干燥、或在自然条件下干燥后,按常规的DNA提取方法、或蛋白质提取方法,分别制备得到家蚕中部和后部丝腺细胞DNA样品、或蛋白质样品。本发明提供了一种简捷、完整的适合于分子生物学研究的家蚕丝腺细胞制备方法,为从事有关家蚕丝腺细胞基因和蛋白质方面的研究奠基础。1、适合于分子生物学研究的家蚕丝腺细胞分离方法,其特征在于: 1)以任何家蚕品种的、新鲜的或冷冻的幼虫为材料,在0℃~50℃的生理盐水中解剖幼虫,分别获取家蚕中部和后部丝腺,用相应的生理盐水充分洗净后,转入预冷的30%-90%的乙醇或甲醇中,浸渍30秒~72小时后,将丝腺固定,用一把镊子一边抱握丝腺表层,一边拉动,剥取丝腺细胞; 2)将上述丝腺细胞在真空干燥器中干燥5分~24小时、或在自然条件下干燥5分~72小时后,按常规的DNA提取方法、或蛋白质提取方法,分别制备得到家蚕中部和后部丝腺细胞DNA样品、或蛋白质样品。

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