技术简介：本发明是一种抗癌基因工程药物的分离纯化方法，涉及纯化工艺流程，填料的选择，以及各纯化步骤的关键技术参数。它包括如下步骤及工艺条件：用低渗冲击法处理样品、硫酸铵沉淀与凝胶过滤、弱阴离子交换层析、亲和层析，最后获得目标蛋白纯品。所获蛋白纯度高达98％以上、得率高达47％以上、工艺操作简单、整个流程耗时少，凝胶柱、亲和柱使用寿命长等为本发明之优点。1、一种抗癌基因工程药物的分离纯化方法，其特征在于该方法包括以下步骤及工艺条件：步骤一 用低渗冲击法处理样品将发酵后所获菌体用15～30％蔗糖溶解、0～6℃下放置10～60min，在低温 -10～4℃下高速离心5000～20000rpm10～60min，去上清，加入5～15mmol/L的磷酸缓冲液溶解，于0～6℃下放置10～60min，在低温-10～4℃下高速离心 5000～20000rpm10～60min获取上清；步骤二 硫酸铵沉淀，凝胶过滤将步骤一所获得的上清中逐步加入硫酸铵晶体至硫酸铵浓度达10～50％，在 0～10℃下离心5000～20000rpm10～60min得蛋白沉淀，用由20mmol/L Tris-HCLpH7.5、1mmol/L EDTA Ph7.5、2mmol/L Mgcl2pH7.5、1mmol/L DTTpH7.5 组成的缓冲液A将蛋白质完全溶解，将溶解后的液体用凝胶填料装填柱过滤，柱型为3.5×90cm的柱子，上样量为10～100ml重新溶解的蛋白溶液，洗脱线速度3～30cm/h，收集各个洗脱峰液，通过SDS-PAGE确定目标蛋白洗脱峰液，目标蛋白